Kultura je mikrobiološki test, katerega namen je odkriti in identificirati mikroorganizme v krvi, urinu, blatu ali drugem biološkem materialu. Cepljenje je večstopenjski postopek in se izvaja le v upravičenih primerih. Preverite, kakšne so indikacije za kulturo in za kaj gre pri testu.
Kulturadomikrobiološki testopravljen za odkrivanje in identifikacijo patogenov v vzorcih biološkega materiala.
Glede na vrsto testiranih patogenov se razlikujetabakteriološka kultura(bakteriološki test) inmikološka kultura(mikološki test).
Glede na vrsto biološkega materiala obstajakulture krvi , urina, blata, semena, sputuma ali vaginalnega izcedka. Biološki material je lahko tudi cerebrospinalna tekočina, brisi iz žrela, ušesa, nosu, ustne sluznice in celo iz očesnih konjunktivnih vrečk, iz pustul in drugih kožnih lezij, pa tudi iz ran, fistul ali abscesov itd.
Kultura - indikacije za test
Kultura se izvaja ob sumu na okužbo, torej ko se pri bolniku pojavijo simptomi. Indikacije za urinokulturo bodo na primer simptomi okužbe sečil, kot so bolečine v križu ali pogosto in boleče uriniranje.
Po drugi strani lahko sumimo na okužbo krvi, ko se pojavijo vročina in mrzlica, hitro dihanje in srčni utrip, padec krvnega tlaka, oslabljena zavest ali oligurija. Vendar pa se kultura blata opravi pri bolniku, ki ima drisko, trebušne krče in/ali kri ali sluz v blatu.
Gojenje urina in izcedka iz nožnice je treba opraviti pri nosečnicah – tudi če ni simptomov okužbe –, da se izključi prisotnost mikroorganizmov, ki bi lahko predstavljali nevarnost za otroka.
Gojenje - zbiranje biološkega materiala
Najprej morate pravilno zbrati vzorec biološkega materiala. Za hemokulture je treba vzeti vsaj dva vzorca krvi iz dveh različnih ven v dve epruveti, ki vsebujeta dve vrsti gojišča (zmožno zaznati tako aerobne kot anaerobne bakterije).
Po drugi strani se biološki material iz nožnice odvzame s posebnim tamponom - en bris se vzame izatrij vagine in drugi okoli anusa. Nato brise položimo tudi na posebno podlago (t.i. transportni substrat). Po drugi strani pa se urinokultura opravi na prvem vzorcu, urin po noči (takrat je število bakterij največje), ki ga zberemo v sterilno posodo s pomočjo t.i. srednji tok.
PomembnoPovejte svojemu zdravniku o vseh zdravilih, ki jih jemljete (zlasti antibiotikih in zdravilih, ki vplivajo na strjevanje krvi), zdravstvenih stanjih in možnih nosilcih s krvjo prenosljivih patogenov (npr. HBV, HCV, HIV) pred inokulacijo.
Gojenje - kaj je test?
1. STOPNJA - SEJANJE
Prva faza je sejanje biološkega materiala, to je nanos vzorca materiala na t.i. gojišče (mikrobiološko). Je mešanica skrbno izbranih hranil, ki omogočajo rast in razmnoževanje mikroorganizmov. Najpogosteje se uporabljajo rastni mediji, obogateni s krvjo, saj zagotavljajo optimalne pogoje za rast večine vrst patogenov.
Inokulacijo lahko izvedemo na več načinov: na tekočem mediju, na agar poševnem, najpogosteje pa na petrijevki (gre za laboratorijsko posodo, valjasto stojalo s širokim ravnim dnom) delček testiranega materiala se razporedi cikcak ali radialno po celotni površini podlage ali pa se razdeli na sektorje in material razporedi po njih.
inokulacija se običajno izvaja v laminarni komori, ki omogoča ohranjanje aseptičnih pogojev. Komora ščiti pred vdorom bakterij ali spor gliv, ki nenehno lebdijo v zraku zunaj komore.
To velja na primer pri urinokulturi. V primeru hemokulture je ta korak izpuščen, saj se medij vnese v sterilne stekleničke ali epruvete, v katere se kri neposredno zbira. Podobno v primeru brisov, ki se takoj po odvzemu položijo na poseben medij in so takoj namenjeni vzreji.
2. STOPNJA - VZGOJ
Po nanosu vzorca na substrat ga damo v inkubator, kjer temperatura ustreza temperaturi človeškega telesa. To so pogoji, ki vodijo do razmnoževanja mikroorganizmov. Spodbujanje rasti želenih mikroorganizmov lahko dosežemo tudi z izbiro ustreznega pH in oksigenacije. Gojenje patogenov traja od 24-48 ur (nekatere vrste bakterij) do več deset dni (nekatere glive).
3. KORAK - IZOLACIJA
Cilj te faze je izolacija določene vrste patogena. V primeru izolacije mikroorganizmovizdela se bakterijska suspenzija specifične gostote, ki bo uporabljena za identifikacijo in določitev občutljivosti seva na zdravila.
4. KORAK - IDENTIFIKACIJA
Trenutno se za identifikacijo mikroorganizmov uporabljajo biokemični, ročni ali avtomatski testi. Primer biokemičnega testa je test API. Sestoji iz vnosa bakterijske suspenzije v vsako od mikroepruvet, ki so vključene v komplet. Naslednja faza je gojenje mikroorganizmov pri pravi temperaturi. Biokemične reakcije, ki potekajo v tem času, bodo povzročile spremembe barve, bodisi spontano bodisi po dodatku indikatorskega reagenta. Za branje se uporablja šifrant ali poseben računalniški program.
Mikrobiološka diagnostika je dopolnjena z mikroskopskim vzorcem, ki omogoča opazovanje patogenih celic po predhodnem obarvanju.
5. KORAK - ANTIBIOGRAM
Po končani inokulaciji se opravi antibiogram za oceno občutljivosti patogena na zdravilo. Mikrobiolog postavi diske z antibiotiki določenih koncentracij na primeren substrat z naneseno bakterijsko suspenzijo (t.i. antibiogram). Odčitki antibiogramov se opravijo z merjenjem velikosti con inhibicije rasti okoli diskov, ki vsebujejo antibiotik.
Na podlagi rezultatov mikrobiološke preiskave in antibiograma se zdravnik odloči o ustreznem zdravljenju.
