Testi lajmske bolezni - kako izgledajo in cena testov za lajmsko bolezen

Teste na lajmsko bolezen je treba opraviti vsakič, ko pride do ugriza klopa. Za začetek diagnoze morate počakati do nekaj tednov. Pred tem je možno testirati klopa, ki nas je ugriznil, ali je prenašalec kakšne bolezni. Kakšno je testiranje na lajmsko boreliozo in kakšna je cena preiskav?

teste lajmske borelioze(bakterijska bolezen, ki jo povzročajo klopi, ki jo povzroča Borrelia burgdorferi in njene sorte) je treba opraviti čim prej po ugrizu klopa.

Pri diagnozi lajmske borelioze se uporabljajo posebne diagnostične sheme, ki temeljijo predvsem na seroloških metodah.

Vendar pa lahko ob upoštevanju zapletenega patomehanizem bolezni in omejitev laboratorijskih metodlajmska bolezen povzroči številne diagnostične težave.

Zato je na trgu vedno več laboratorijskih testov, ki bi lahko rešili ta problem. Na žalost večina od njih nima dokazane diagnostične vrednosti in jih ne bi smeli uporabljati pri rutinski diagnozi lajmske borelioze.

Vsebina:

1. Zgodnja lokalna lajmska bolezen - laboratorijski testi
2. Zgodnja razširjena lajmska bolezen - lajmski test
3. Pozna lajmska bolezen - s katerimi testi odkrivamo lajmsko boreliozo?
4. Lymska borelioza - spremljanje zdravljenja
5. lajmska bolezen - krožeči imunski kompleksi
6. lajmska bolezen - test transformacije limfocitov (LTT)
7. lajmska bolezen - test CD57
8. Berlioz - ELFA in CLIA test
9. lajmska bolezen - pregled odstranjenega klopa s kože

Zgodnja lokalna lajmska bolezen - laboratorijski testi

V tej fazi po stiku z okuženim klopom pride do lokalne okužbe in t.i. tavajoči eritem (latinsko erythema migrans), ki je značilen simptom lajmske borelioze.

Prisotnost eritema na mestu ugriza klopa zadostuje za diagnosticiranje okužbe z borelijo . Zgodnja lokalna faza lajmske borelioze traja od nekaj dni do približno 4 tednov, pri bolniku pa se lahko pojavijo simptomi, podobni gripi.

To je najzgodnja stopnja okužbe, v kateri serološke metode (ELISA in Western blots) preverjajo prisotnostProtitelesa IgM in IgG lahko dajo lažno negativne rezultate. V tej fazi je t.i serološko okno, torej začetno obdobje okužbe, v katerem telo še ne proizvaja protiteles proti boreliji.

Prva protitelesa IgM se pojavijo približno 2 tedna bolezni , vendar večina ljudi njihovo prisotnost zazna šele po nekaj tednih. V primeru negativnega serološkega rezultata je treba test ponoviti približno 3-4 tedne po okužbi.

ELISA in Western blot teste povrne Nacionalna zdravstvena sklada, vendar mora napotni zdravnik imeti razloge za njihovo naročilo.Zasebno test ELISA stane od 30 do 100 PLN, Western blot pa od 80 do 200 PLN.

V zelo zgodnji fazi okužbe lahko pride v poštev molekularno testiranje PCR. Metoda zazna bakterijski genetski material (DNK), ki ga je v telesnih tekočinah največ v zgodnji fazi okužbe. Daljši kot je čas od okužbe, manjša je verjetnost odkrivanja bakterijske DNK.

Vendar je treba upoštevati, dana Poljskem še vedno ni standardizacije molekularnih metod pri diagnozi lajmske bolezniin zato ta metoda ni priporočljiva kot diagnostična orodje. Bmolekularne zaloge ne povrne nacionalni zdravstveni sklad in stane med 160 in 200 PLN.

Vredno vedeti

Faze okužbe z Borrelia burgdorferi:

• zgodnja lokalna lajmska bolezen
• zgodnja razširjena lajmska bolezen
• pozna borelioza

Zgodnja razširjena lajmska bolezen - lajmski test

V zgodnji fazi razširjene lajmske borelioze so okuženi številni organi, sklepi, mišice, živčni in srčno-žilni sistem. Zgodnja lajmska bolezen se razvije s simptomi, kot so glavoboli, vnetje obraznega živca, utrujenost ali togost vratu. Ta faza traja približno nekaj tednov od trenutka okužbe.

V zgodnji fazi diseminirane lajmske borelioze so prisotna protitelesa IgM. V 6-8 tednih po okužbi se začnejo pojavljati tudi protitelesa IgG. Zato so osnova diagnoze na tej stopnji okužbe serološke metode.

Serološka diagnoza lajmske borelioze se začne s presejalno fazo, to je občutljivim ELISA testom.

Če je rezultat negativen, to pomeni, da niso bile odkrite spirohete Borrelia ali pa je rezultat lažno negativen. Ko je rezultat pozitiven ali šibko pozitiven, je treba izvesti potrditveni Western blot , ki je zelo specifičen, da potrdimo rezultate z metodo ELISA.

V primeru suma na nevroboreliozo se lahko naredimolekularni PCR test iz cerebrospinalne tekočine. Metoda PCR je zelo občutljiva in glede na to, da je število spirohetov Borrelia v cerebrospinalni tekočini majhno, je lahko v pomoč pri postavitvi diagnoze.

Sam po sebi, brez predhodnega serološkega testiranja, ne predstavlja diagnoze okužbe.

Pozna lajmska bolezen - s katerimi testi odkrivamo lajmsko boreliozo?

Zadnja stopnja okužbe je pozna lajmska borelioza, pri kateri pride do nadaljnjega širjenja bakterij na organe in nastajanja vedno hujših zapletov okužbe. Pojavijo se pozna lajmska borelioza, sklepna borelioza ali atrofični dermatitis. Pozna lajmska bolezen lahko traja tudi več let.

V tej fazi okužbe se s serološkimi metodami odkrijejo samo protitelesa IgG.Visoke ravni IgG proti spirohetam Borrelia in kombinacija simptomov kažejo na lajmsko bolezen.Vendar pa v nekaterih primerih (zlasti pri ljudeh, ki so zelo hitro prejeli antibiotično terapijo v zgodnji fazi okužbe), IgM protitelesa lahko vztrajajo tudi več let. V takih situacijah ta protitelesa ne kažejo na aktivno okužbo.

Kaj je lajmska bolezen?

Lymska borelioza - spremljanje zdravljenja

Ena največjih težav pri diagnozi lajmske borelioze je pomanjkanje občutljivih in specifičnih laboratorijskih označevalcev, ki bi lahko ocenili učinkovitost antibiotične terapije. Standardna metoda za oceno njegove učinkovitosti je opazovanje simptomov bolezni.

Raziskave kažejo, da se za spremljanje učinkovitosti okužbe z borelijo lahko uporabi določitev ravni protiteles IgM in IgG proti antigenu spirohete VLsE/C6.

Spiralni protein VlsE / C6 povzroča zelo močan in hiter odziv imunskega sistema. Dodatek tega antigena naboru seroloških testov bistveno poveča občutljivost testa. Prisotnost protiteles IgG proti proteinu VLsE/C6 pri bolnikih z lajmsko boleznijo je:

• 20-50%pri bolnikih v zgodnji fazi okužbe
• 70-90%pri bolnikih z zgodnjo razširjeno lajmsko boreliozo
• skoraj 100 %pri bolnikih s pozno lajmsko boleznijo

Nacionalna zdravstvena blagajna ne povrne stroškov preiskave in stane med 80 in 150 PLN.

lajmska bolezen - krožeči imunski kompleksi

Osnova za diagnozo lajmske bolezni je serološko testiranje. Vendar pa obstajajo klinične situacije, ki lahko vodijo do lažno negativnega rezultata. Ena izmed njih je prisotnost t.i imunski kompleksi, ki jih sestavljajo spirohete Borrelia in specifični antigeniProtitelesa IgM ali IgG.

Imunski kompleksi blokirajo protitelesa, zaradi česar jih ni mogoče odkriti s serološkimi metodami in zato lahko povzročijo lažno negativne rezultate.Ta težava se pojavlja predvsem pri zelo intenzivnih okužbah.

Če ima bolnik očitne simptome lajmske borelioze in so rezultati testa negativni, nekateri laboratoriji ponujajo test, ki vključuje kemično razgradnjo imunskih kompleksov.Ta postopek je namenjen sproščanju protiteles in šele nato merjenju njihove koncentracije.

Raziskave kažejo, da lahko uporaba takega postopka pred serološkim testiranjem znatno poveča odkrivanje protiteles proti antigenom borelije. Vendar se ta metoda ne uporablja rutinsko zaradi pomanjkanja standardizacije v laboratorijih.

Cena testa se giblje od 110 do 210 PLN(za protitelesa IgM ali IgG)in je ne povrne Nacionalni zdravstveni sklad.

lajmska bolezen - test transformacije limfocitov (LTT)

Test transformacije limfocitov (LTT) se uporablja na različnih področjih medicine, vključno z v transplantologiji, alergologiji in posredno pri diagnostiki spirohete Borrelia. Pri diagnozi lajmske borelioze s testom ugotovimo prisotnost imunskih celic (limfocitov T) v pacientovi krvi, ki so bile v stiku z bakterijo. Test uporablja tehniko ELISPOT, katere princip je podoben metodi ELISA, vendar je bolj občutljiv od nje.

Nekateri ljudje navajajo, da je treba opraviti LTT testiranje na spirohete Borrelia, da:

• potrditev aktivne okužbe pri ljudeh s pozitivnimi rezultati seroloških testov, vendar brez simptomov, ki jasno kažejo na bolezen
• potrditev aktivne okužbe pri ljudeh z negativnimi ali mejnimi rezultati seroloških testov, vendar s kliničnimi simptomi bolezni
• spremljanje okužbe po zdravljenju z antibiotiki
• ocena ponovitve lajmske bolezni

Glede na priporočila delovne skupine, objavljena leta 2014, tako LTT test kot določanje ravni protiteles v krožečih imunskih kompleksih nista priporočljiva pri diagnozi lajmske borelioze.

Te metode je treba še potrditi (tj. potrditi, da so zanesljive), da bodo uporabno diagnostično orodje.

Cena testa je 400-550 PLN in je ne povrne nacionalni zdravstveni sklad.

lajmska bolezen - test CD57

Površinski marker CD57 je beljakovina, ki se pojavlja na površini imunskih celic - NK celic(Naravni morilci).

Zdravniki iz skupine ILADS, torej Mednarodnega združenja za lajmsko bolezen in sorodne bolezni, menijo, da je v kronični fazi lajmske borelioze zatrjen imunski sistem, kar se odraža v zmanjšanju populacije NK celic. z oznako CD57.

Predpostavljajo, da se lahko določitev njihovega števila v krvi uporabi za oceno aktivnosti bolezni. Vendar pa je podobno kot pri LTT metodi in motnjah imunskih kompleksov treba to metodo še potrditi.Cena testa je 170 PLN in je ne povrne nacionalni zdravstveni sklad.

Več o testu CD57 najdete tukaj.

Berlioz - ELFA in CLIA test

Metoda ELISA(encimsko-imunosorbentni test) se uporablja predvsem pri diagnozi lajmske bolezni. Vendar pa mnogi laboratoriji uporabljajo tudi druge serološke metode, kot je ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay), opravljen z Vidas® in CLIA (Chemiluminescent Immunoassay), opravljen z analizatorjem Liaison®.

Kakšne so razlike? Načelo delovanja treh metod je zelo podobno in uporablja specifična protitelesa ter njihovo sposobnost vezave na antigene. Metodi ELFA in CLIA omogočata avtomatizacijo analiz in hitrejšo izvedbo testov v laboratoriju. Te metode lahko zaznajo tudi nižje koncentracije protiteles v testiranem biološkem materialu.

Ko gre za verodostojnost rezultatov, pridobljenih s tremi metodami, so skoraj enaki.Pozitivne ali šibke pozitivne rezultate z metodami ELFA in CLIA, tako kot pri metodi ELISA, je treba potrditi z Western blot metodo.

Vredno vedeti

Lymska bolezen - pregled klopa, odstranjenega s kože

Nekateri laboratoriji ponujajo testiranje klopa, odstranjenega s kože, na prisotnost DNK borelije. Po priporočilih delovne skupine, objavljenih leta 2014, taka študija absolutno ni diagnostična metoda lajmske borelioze.

Čeprav je tveganje za prenos bakterij s klopov na ljudi sorazmerno s časom sesanja krvi, prisotnost spirohetne DNK v klopu ni sinonim za okužbo in njena odsotnost ne izključuje okužbe.

Zagovorniki metode verjamejo, da je v pomoč pri odločitvi o uvedbi antibiotične terapije pri ljudeh s simptomi, ki kažejo na lajmsko boreliozo, vendar brez prisotnosti migrirajočega eritema.Cena takšnih anketirancev se giblje od 100 do 500 PLN in je ne povrne nacionalni zdravstveni sklad.

Reference

1. Laboratorijska diagnostika bolezni, ki jih prenašajo klopi Priporočila delovne skupine: Državna zbornicaLaboratorijski diagnostiki, Nacionalni inštitut za javno zdravje-Nacionalni inštitut za higieno, nacionalni svetovalec na področju nalezljivih bolezni, Oddelek za nalezljive bolezni in nevroinfekcije, Medicinska univerza v Białystoku, Poljsko društvo za virusologijo, Varšava 2014.
2. Rychlik U. et al Laboratorijska diagnostika testa limfocitne transformacije (LTT). Časopis za laboratorijsko diagnostiko 2013, 49 (4); 425-428.
3. Marques A. R. Laboratorijska diagnoza lajmske bolezni – napredki in izzivi. Okuži Dis Clin North Am. 2015; 29 (2): 295-307.
4. Marques A. et al Število naravnih celic ubijalk se ne razlikuje med bolniki s sindromom po lymski bolezni in kontrolnimi skupinami. Clin Vaccine Immunol. 2009; 16: 1249-1250.
5. Krzemień P. J. Pomen antigena Vlse / C6 kot označevalca pri diagnozi zgodnje lymske borelioze in preučevanju učinkovitosti njenega zdravljenja. Zdravstveni problemi civilizacije 2022; 11 (2): 87-92.
6. Miąskiewicz K. in drugi Predlog novega metodološkega pristopa in interpretacija rezultatov protiteles proti Borrelia burgdorferi - analiza protitelesne sestave krožečih imunskih kompleksov. Revmatologija 2011; 49, 5: 328-334.
7. Muraczyńska B. in Gałęziowska E. Kontroverze v zvezi z diagnozo in zdravljenjem lajmske borelioze v svetu. Splošna medicina in zdravstvene vede, 2015; 21 (4): 372-377.

O avtorjuKarolina Karabin, dr.med., molekularni biologinja, laboratorijska diagnostika, Cambridge Diagnostics PolskaPo poklicu biologinja, specialistka mikrobiologije, in laboratorijska diagnostika z več kot 10 letnimi izkušnjami v laboratorijskem delu. Diplomant Visoke šole za molekularno medicino in član poljskega združenja za humano genetiko. Vodja raziskovalnih štipendij v Laboratoriju za molekularno diagnostiko na Oddelku za hematologijo, onkologijo in notranje bolezni Medicinske univerze v Varšavi. Zagovarjala je naziv doktorice medicinskih znanosti s področja medicinske biologije na 1. medicinski fakulteti Medicinske univerze v Varšavi. Avtor številnih znanstvenih in poljudnoznanstvenih del s področja laboratorijske diagnostike, molekularne biologije in prehrane. Dnevno kot specialist na področju laboratorijske diagnostike vodi vsebinski oddelek v Cambridge Diagnostics Polska in sodeluje z ekipo nutricionistov na CD Dietary Clinic. Svoje praktično znanje o diagnostiki in dietoterapiji bolezni deli s specialisti na konferencah, izobraževanjih ter v revijah in spletnih straneh. Zanima jo predvsem vpliv sodobnega načina življenja na molekularne procese v telesu.