Test antinuklearnih protiteles (ANA) se uporablja kot primarni test za oceno bolnikovega stanja zaradi avtoimunskih bolezni vezivnega tkiva. To so motnje, ki prizadenejo številna tkiva in organe po celem telesu. Kaj kažejo rezultati testa? Kaj so ANA? Katere bolezni lahko odkrije test ANA?

Vsebina:

  1. ANA test - kaj so antinuklearna protitelesa?
  2. ANA test - uporaba v diagnostiki
  3. ANA test - prisotnost ANA v krvi zdravih ljudi
  4. ANA test - kako je ime?
  5. ANA test - kdaj je treba opraviti test ANA?

OkrajšavaANAizvira iz angleškega imena anti-nuclear antibodies, kar v poljščino prevaja kot "antinuklearna protitelesa". Te molekule spadajo v beljakovine, imenovane avtoprotitelesa, torej tiste, ki napadajo organizem, ki jih proizvaja.

ANA test - kaj so antinuklearna protitelesa?

Človeško telo ima veliko obrambnih mehanizmov pred patogeni. Eden od njih je humoralna imunost. Temelji na proizvodnji zaščitnih protiteles. Pri zdravih ljudeh imunski sistem proizvaja protitelesa proti tujim antigenom.

Včasih pa obstajajo situacije, ko se proizvajajo avtoantigeni, ki so usmerjeni proti beljakovinam v našem telesu. Ta proces je bistvenega pomena za nastanek avtoimunskih bolezni.

Antinuklearna protitelesa napadajo beljakovine in druge molekule, ki sestavljajo jedro.

Obstaja veliko različnih vrst ANA. Razgradnja teh protiteles temelji na vrstah jedrskih komponent, proti katerim so te molekule usmerjene. Odvisno od vrste se lahko ANA vežejo tako na posamezne beljakovine kot na kompleksne komplekse.

Na primer, obstajajo protitelesa proti jedrskim kanalom in histonom, torej molekulam, na katerih je navita DNK.

Napadajočo ANA je mogoče razlikovati:

  • DNK
  • histony
  • ribonukleoproteini
  • jedrska RNA
  • nehistonski proteini

Vse te komponente so specifične za celično jedro.

ANA so prisotne v krvi med različnimi boleznimi. To vključuje avtoimunske motnje, raka in nekatere vrste okužb. To omogoča zauporaba antinuklearnih protiteles pri diagnozi nekaterih bolezenskih stanj.

ANA test - uporaba v diagnostiki

Test ANA se uporablja za odkrivanje antinuklearnih avtoprotiteles v pacientovi krvi. Ta test je pomemben za diagnozo bolezni, kot so:

  • sistemski eritematozni lupus
  • Sjögrenov bend
  • skleroderma
  • polimiozitis
  • dermatomiozitis
  • avtoimunski hepatitis
  • kotanje zaradi reakcije na zdravila

Pozitiven rezultat testa ANA je diagnostičen le, če obstajajo klinični znaki, ki to potrjujejo. Testiranje protinuklearnih protiteles je lahko koristno tudi za spremljanje napredovanja bolezni.

Tipični testi, ki se uporabljajo za odkrivanje in vrednotenje ANA, so:

  • posredna imunofluorescenca
  • ELISA-encimski imunosorbentni test

Metoda posredne imunofluorescence

Indirektna imunofluorescenca je eden najpogosteje uporabljenih testov za prisotnost ANA. Običajno ta test uporablja celice Hep-2. Nanesejo se v obliki tanke plasti na mikroskopska stekelca. Nato se serum, zbran od pacienta, položi nanje in inkubira s celicami Hep-2.

Če je v odvzetem vzorcu prisotna ANA, se po inkubacijskem obdobju odkrije v obliki, ki je povezana z antigeni v celičnem jedru. To je mogoče videti z dodajanjem fluorescenčne oznake, ki se veže na protitelesa.

V ta namen se najpogosteje uporablja fluorescein ali rodopsin B izotiocianat (FITC) ali rodopsin B. Molekula fluorescira, ko jo zadene žarek svetlobe določene valovne dolžine. Za opazovanje in ocenjevanje fluorescence se uporablja mikroskop.

Opazimo lahko različne vzorce fluorescence, odvisno od vrste protiteles, prisotnih v človeškem serumu, in lokalizacije antigena v celicah HEp-2. Njihova analiza omogoča določitev vrst protiteles, ki so prisotna v vzorcu.

Ravni protiteles se določijo s serijskimi razredčitvami krvnega seruma. Test ANA se šteje za pozitivnega, če opazimo fluorescenco pri titru 1:40/1:80. Vendar je rezultat, večji od 1:160, pomemben diagnostično.

Encimsko-vezan imunski test (ELISA)

Encimski imunski test (ELISA) uporablja mikrotiterske plošče, v katere so nameščeni antigeni za odkrivanje ANA. Vsaka vdolbinica plošče je prevlečena z enim ali več antigeni. To je za odkrivanje specifičnih protiteles.

Krvni serum se inkubira vplošče vdolbine in jih nato izperite. Če so bila v vzorcu prisotna antinuklearna protitelesa, bodo po izpiranju ostala vezana na ustrezne antigene na mikrotiterski plošči.

V naslednjem koraku testa se v jamico na plošči doda drugo protitelo, vezano na encim. Encimatska reakcija povzroči spremembo barve raztopine.

Razlika v barvi je sorazmerna količini protitelesa, vezanega na antigen, v vdolbinici plošče. Barvo dobljene raztopine lahko ocenimo s spektrofotometrično metodo, to je z merjenjem jakosti svetlobnega snopa, ki se prenaša skozi raztopino.

ANA test - prisotnost ANA v krvi zdravih ljudi

Ocenjuje se, da so pri 5 % človeške populacije antinuklearna protitelesa prisotna v krvi v koncentracijah, ki se štejejo za diagnostično pomembne, ne glede na prisotnost bolezni.

Ker pogostost ANA narašča s starostjo, je kar 10-37 % zdravih ljudi, starejših od 65 let, pozitivnih na prisotnost ANA. Takšni primeri so pogostejši pri ženskah kot pri moških.

ANA test - kako je ime?

Značilna vrednost za test ANA je titer. Označuje stopnjo razredčenosti seruma, pri kateri postanejo antinuklearna protitelesa nezaznavna. Višja kot je koncentracija ANA v krvi, višji je titer v rezultatih testa.

Če je titer nad 1:160, je priporočljivo opraviti test specifičnosti protinuklearnih protiteles. Te dodatne preiskave je treba opraviti v povezavi z analizo bolnikove klinične anamneze in fizičnim pregledom. Cilj teh korakov je diagnosticirati ali izključiti avtoimunske motnje.

Opozoriti pa je treba, da se tak rezultat pojavi pri 5 % bolnikov, ne glede na bolezensko stanje. Rezultat testa je diagnostičen le, če obstajajo drugi simptomi bolezni.

Negativen rezultat ANA testa kaže, da je malo verjetno, da bi imel bolnik lupus ali drugo avtoimunsko bolezen.

ANA test - kdaj je treba opraviti test ANA?

Test ANA se naroči, ko pacientovi simptomi kažejo na sistemsko avtoimunsko motnjo. Lahko so zelo neočitni in nespecifični ter se sčasoma spreminjajo.

Primeri simptomov so:

  • Nizka vročina
  • Vztrajna utrujenost
  • bolečina, podobna artritisu
  • Rdeči izpuščaj
  • Občutljivost kože na svetlobo
  • Izpadanje las
  • bolečine v mišicah
  • odrevenelost ali mravljinčenje v rokah ali nogah
  • Vnetje organov in tkiv (ledvice, pljuča, srce, srčna sluznica, centralni živčni sistemživec ali krvne žile)
O avtorjuSara Janowska, mag. farmacijeDoktorski študent interdisciplinarnega doktorskega študija na področju farmacevtskih in biomedicinskih znanosti na Medicinski univerzi v Lublinu in Biotehnološkem inštitutu v Białystoku, diplomant farmacije na Medicinski univerzi v Lublinu s specializacijo iz rastlinske medicine. Magistrirala je z zagovorom naloge s področja farmacevtske botanike o antioksidativnih lastnostih izvlečkov, pridobljenih iz dvajsetih vrst mahov. Trenutno se v svojem raziskovalnem delu ukvarja s sintezo novih protirakavih snovi in ​​proučevanjem njihovih lastnosti na rakavih celičnih linijah. Dve leti je delala kot magistrica farmacije v odprti lekarni.

Preberite več od tega avtorja

Kategorija:

Raziskave