Antinuklearna protitelesa so del kompleksnega diagnostičnega procesa za sistemske bolezni vezivnega tkiva. Zapleten mehanizem tvorbe antinuklearnih protiteles otežuje interpretacijo njihovih rezultatov, prisotnost ali odsotnost posameznih protiteles pa ne kaže vedno na bolezenski proces. Kakšne so vrste antinuklearnih protiteles? Kdaj je treba opraviti test?

Vsebina:

  1. Antinuklearna protitelesa - vrste
  2. Antinuklearna protitelesa - nastanek in mehanizem delovanja
  3. Antinuklearna protitelesa - indikacije za test
  4. Antinuklearna protitelesa - o čem je raziskava?
  5. Antinuklearna protitelesa - kako razlagati rezultat?

Protinuklearna protitelesa( ANA , protinuklearna protitelesa) so avtoprotitelesa, usmerjena proti elementom celičnega jedra, npr. DNK in citoplazmi. So ena najbolj raznolikih in najbolj raziskanih protiteles.

Antinuklearna protitelesa - vrste

  • protitelesa proti jedrskim antigenom, ki jih je mogoče ekstrahirati (anti-ENA):
    • proti DNA topoizomerazi I (anti-Scl70)
    • proti ribonukleoproteinu (anti-RNP)
    • proti Smithovemu antigenu (anti-Sm)
    • anti-Mi2 / Mi-2
    • anti-Ro (SS-A)
    • anti-La
    • anti-Jo1
    • anti-PM-Scl
    • anti-Kn
  • protitelesa proti proteinu, ki tvori pore gp-2010 (anti-gp-210)
  • protitelesa proti nativni dvoverižni DNK (anti-dsDNA)
  • proticentromerna protitelesa (anti-ACA)

Antinuklearna protitelesa - nastanek in mehanizem delovanja

Avtoimunost je nenormalen odziv imunskega sistema na lastna tkiva, ki ima za posledico nastanek avtoimunskih bolezni.

Opisani so različni mehanizmi avtoimunosti, eden izmed njih je sproščanje antigenov, skritih pred imunskim sistemom, na primer zaradi vnetne poškodbe tkiva.

Sprostijo se elementi, ki jih najdemo v celičnem jedru, na primer DNK, RNA, histoni, ki jih imunski sistem začne prepoznavati kot tuje in proti njim proizvaja protinuklearna protitelesa.

Antinuklearna protitelesa - indikacije za test

  • sum bolezni vezivnega tkiva:
    • sistemski eritematozni lupus (prisotnost protiteles pri 95-100 % bolnikov; protitelesa proti dsDNA so specifičen marker bolezni)
    • lupus, ki ga povzročajo zdravila (95-100 % bolnikov)
    • antifosfolipidni sindrom (40-50 % bolnikov)
    • sistemska skleroza (80-95 % bolnikov, zlasti protitelesa proti Scl70)
    • polimiozitis in dermatomiozitis (40-80 % bolnikov, zlasti protitelesa proti Jo1 in Mi2)
    • Sjögrenov sindrom (48-96 % bolnikov, zlasti protitelesa proti Ro in anti-La)
    • revmatoidni artritis (približno 10 % bolnikov)
    • juvenilni idiopatski artritis (manj kot 10 % bolnikov)
    • Raynaudov sindrom (20-60 % bolnikov)
    • fibromialgija (15-25 % bolnikov)
    • mešane bolezni vezivnega tkiva (95-100 % bolnikov)
  • ocena aktivnosti bolezni in spremljanje učinkovitosti zdravljenja, npr. protitelesa proti dsDNA pri sistemskem lupusu
  • povezovanje prisotnosti protiteles s pojavom specifičnih simptomov bolezni, na primer Sjögrenov sindrom in prisotnost protiteles proti Ro in anti-La
  • napovedovanje bolezni v prihodnosti

Antinuklearna protitelesa - o čem je raziskava?

Krv, odvzeta iz komolca na prazen želodec, se uporablja za določanje antinuklearnih protiteles.

Metode za določanje protiteles so zelo različne in so odvisne od vrste antinuklearnega protitelesa, ki se testira. To so predvsem imunološke metode, kot so:

  • ELISA
  • RIA
  • posredna imunofluorescenca
  • metoda dvojne imunodifuzije
  • western blot

V primeru antinuklearnih protiteles se uporablja dvostopenjska diagnoza. Najprej se opravi presejalni test z uporabo visoko občutljive metode posredne imunofluorescence.

Metoda indirektne imunofluorescence je sestavljena iz imobilizacije celic HEp-2, pridobljenih iz človeških epitelijskih celic, na stekelcu mikroskopa.

Celice te linije imajo v citoplazmi in jedru antigene, ki vežejo patološka protitelesa iz pacientove krvi.

Po dodajanju pacientovega seruma na stekelce se antinuklearna protitelesa vežejo na specifične antigene in so vidna pod mikroskopom zahvaljujoč posebnim fluorescentnim markerjem.

Prednost posredne imunofluorescence je sposobnost razlikovanja vrst protiteles na podlagi vrste osvetlitve fluorescenčnega barvila.

Na primer, žareče jedro homogene vrste pomeni prisotnost anti-dsDNA ali anti-ssDNA.

Pozitiven rezultat presejalnega testa je treba vedno potrditi. V ta namen se uporabljajo zelo specifične imunološke metode, na primer western blot. Po odkrivanju prisotnosti in identifikaciji vrste antinuklearnega protitelesa se določi njegov titer, to je največja razredčitev seruma, v kateri je mogoče zaznati prisotnost protiteles.

Antinuklearna protitelesa - kako razlagati rezultat?

Pravilni titer antinuklearnih protiteles mora biti pod 1:40.

Če je presejalni test za antinuklearna protitelesa negativen in ni kliničnih simptomov, ki bi kazali na sistemsko bolezen vezivnega tkiva, se diagnoze ne sme razširiti na specifična protitelesa, npr. anti-dsDNA, anti-Sm.

Šteje se, da so klinično pomembni titri pri odraslih ≥ 1: 160, pri otrocih pa ≥ 1:40.

V primeru pozitivnih rezultatov je predlagano, da se rezultat testa interpretira na naslednji način:

  • titer 1: 40-1: 80 - mejni rezultat (šibko pozitiven), v odsotnosti kliničnih simptomov bolezni vezivnega tkiva ni priporočljivo ponoviti testa ali opraviti nadaljnjega testa, ker rezultati pri večini ljudi se z leti ne spremenijo
  • titer 1: 160-1: 640 - srednje pozitiven rezultat, v odsotnosti kliničnih simptomov bolezni vezivnega tkiva je priporočljivo ponoviti test po 6 mesecih
  • titer ≥ 1: 1280 - visok pozitiven rezultat, ob prisotnosti kliničnih simptomov bolezni vezivnega tkiva je potrebna nadaljnja specialistična diagnoza za diagnosticiranje bolezni

Upoštevati je treba, da je serološko testiranje na antinuklearna protitelesa del kompleksnega diagnostičnega procesa, pozitiven rezultat pa je treba vedno interpretirati v kontekstu klinične slike in prisotnosti značilnih simptomov bolezni.

Antinuklearna protitelesa z nizkim titrom so prisotna pri 5 % zdrave populacije in njihova pogostnost se s starostjo povečuje.

Poleg tega najdemo njihovo prisotnost v fizioloških in patofizioloških stanjih, pri katerih antinuklearna protitelesa nimajo diagnostičnega pomena:

  • okužbe, npr. tuberkuloza, sifilis, malarija
  • bolezni jeter, npr. ciroza
  • pljučne bolezni, npr. sarkoidoza, azbestoza
  • rak, npr. levkemija, limfom, rak dojke, melanom
  • kožne bolezni, npr. luskavica, lichen planus
  • po presaditvi organa, npr. presaditvi srca, presaditvi ledvice
  • uporaba zdravil, npr. antiepileptikov, hidralazina, litijeve soli,
  • druge avtoimunske bolezni, npr. Hashimotova bolezen, Addisonova bolezen, sladkorna bolezen tipa I
  • nosečnost(do 20 % nosečnic)
Vredno vedeti…

Za nastanek različnih vrst protinuklearnih protiteles je značilna etnična variabilnost.

Na primer, belci s sistemsko sklerozo imajo večjo verjetnost, da imajo protitelesa proti ACA, Afroameričani in Afroameričani pa bolj verjetno imajo protitelesa, reaktivna na topoizomerazo.

O avtorjuKarolina Karabin, dr.med., molekularni biologinja, laboratorijska diagnostika, Cambridge Diagnostics PolskaPo poklicu biologinja, specialistka mikrobiologije, in laboratorijska diagnostika z več kot 10 letnimi izkušnjami v laboratorijskem delu. Diplomant Visoke šole za molekularno medicino in član poljskega združenja za humano genetiko. Vodja raziskovalnih štipendij v Laboratoriju za molekularno diagnostiko na Oddelku za hematologijo, onkologijo in notranje bolezni Medicinske univerze v Varšavi. Zagovarjala je naziv doktorice medicinskih znanosti s področja medicinske biologije na 1. medicinski fakulteti Medicinske univerze v Varšavi. Avtor številnih znanstvenih in poljudnoznanstvenih del s področja laboratorijske diagnostike, molekularne biologije in prehrane. Dnevno kot specialist na področju laboratorijske diagnostike vodi vsebinski oddelek v Cambridge Diagnostics Polska in sodeluje z ekipo nutricionistov na CD Dietary Clinic. Svoje praktično znanje o diagnostiki in dietoterapiji bolezni deli s specialisti na konferencah, izobraževanjih ter v revijah in spletnih straneh. Zanima jo predvsem vpliv sodobnega načina življenja na molekularne procese v telesu.

Preberite več od tega avtorja

Kategorija:

Raziskave